Ključna razlika - protočna citometrija prema FACS

U kontekstu stanične teorije, stanice su osnovna strukturna i funkcionalna cjelina svih živih organizama. Sortiranje stanica je metodologija koja se koristi za odvajanje različitih stanica prema fiziološkim i morfološkim značajkama. Mogu biti unutarstaničnih ili izvanstaničnih karakteristika. Interakcija DNA, RNA i proteina smatra se unutarstaničnim interaktivnim svojstvima dok se oblik, veličina i različiti površinski proteini smatraju izvanćelijskim svojstvima. U suvremenoj znanosti, metodologije sortiranja stanica dovele su do pomaganja različitim istraživanjima u biološkim studijama, ali i do uspostavljanja novih principa kroz medicinu. Razvrstavanje stanica provodi se na različitim metodologijama koje uključuju i primitivne s manje opreme i napredne tehnološke metodologije uz uporabu sofisticirane mehanizacije. Protok citometrija, fluorescentno razvrstavanje stanica aktivirano (FACS), selekcija magnetskih ćelija i sortiranje pojedinačnih stanica glavne su korištene metodologije. Protokna citometrija i FACS razvijeni su tako da diferenciraju stanice prema svojim optičkim svojstvima. FACS je specijalizirana vrsta protočne citometrije. Protok citometrija je metodologija koja se koristi tijekom analize heterogene populacije stanica prema različitim molekulama stanične površine, veličini i volumenu koja omogućava ispitivanje pojedinih stanica. FACS je postupak kojim se uzorak smjese stanica razvrstava prema njihovim karakteristikama raspršivanja svjetlosti i fluorescencije u dva ili više spremnika. Ovo je ključna razlika između protočne citometrije i FACS.

SADRŽAJ

1. Pregled i ključne razlike 2. Što je protočna citometrija 3. Što je FACS 4. Sličnosti između protočne citometrije i FACS 5. Usporedna usporedba - protočna citometrija prema FACS u tabelarnom obliku 6. Sažetak

Što je protočna citometrija?

Protok citometrija je metoda koja se koristi za ispitivanje i određivanje ekspresije unutarćelijskih molekula i stanične površine te za definiranje i karakterizaciju različitih tipova stanica. Koristi se i za određivanje volumena i veličine stanice i za procjenu čistoće subpopulacija koje su izolirane. To omogućava vrednovanje više parametara pojedinačnih ćelija istovremeno. Protok citometrija koristi se za mjerenje intenziteta fluorescencije koja nastaje zahvaljujući fluorescentno obilježenim antitijelima koja pomažu identificirati proteine ​​ili ligande koji se vežu na pridružene stanice.

Općenito, protočna citometrija uključuje uglavnom tri podsustava. Oni su fluidi, elektronika i optika. U protočnoj citometriji dostupno je pet glavnih komponenti koje se koriste u razvrstavanju stanica. Oni su protočna ćelija (struja tekućine koja se koristi za njihovo prenošenje i poravnavanje stanica za proces optičkog senziranja), sustav mjerenja (može biti u različitim sustavima, uključujući živu i ksenonsku lampu, vodenom hlađenom vodom velike snage ili zračni hlađenje male snage ili diodni laseri), ADC; Analogni digitalni pretvarač, pojačalo i računalo za analizu. Akvizicija je postupak kojim se podaci prikupljaju iz uzoraka pomoću protočnog citometra. Taj postupak posreduje računalo koje je povezano s protočnim citometrom. Softver prisutan na računalu analizira informacije koje se u računalo dovode s protočnog citometra. Softver također ima mogućnost podešavanja parametara pokusa koji kontroliraju protočni citometar.

Što je FACS?

U kontekstu protočne citometrije, sortiranje stanica pomoću Fluorescencije (FACS) metoda je koja se koristi u diferenciranju i sortiranju uzorka mješavine bioloških stanica. Stanice su odvojene od dva ili više spremnika. Metoda sortiranja temelji se na fizičkim značajkama stanice koja uključuje svojstva raspršivanja svjetlosti i fluorescencije stanice. Ovo je važna znanstvena tehnika, koja se može koristiti za dobivanje pouzdanih kvantitativnih i kvalitativnih rezultata fluorescentnih signala koji se emitiraju iz svake stanice. Za vrijeme FACS-a, u početku je prethodno dobivena mješavina stanica; suspenzija je usmjerena u sredinu uskog strujanja tekućine koja brzo teče. Tok tekućine dizajniran je tako da se odvoje stanice u suspenziji na temelju promjera svake stanice. Na tok suspenzije primjenjuje se mehanizam vibracija što rezultira stvaranjem pojedinih kapljica.

Sustav je kalibriran kako bi stvorio jednu kapljicu s jednom ćelijom. Neposredno prije stvaranja kapljica, suspenzija protoka kreće se duž uređaja za mjerenje fluorescencije koji otkriva fluorescenciju karakterističnu za svaku stanicu. Na mjestu stvaranja kapljica postavlja se električni prsten za punjenje koji se nakuplja nabojem u prsten prije mjerenja intenziteta fluorescencije. Jednom kada se kapljice formiraju iz toka suspenzije, unutar kapljica se zadržava naboj koji zatim ulazi u elektrostatički sustav odbijanja. Prema naboju, sustav prebacuje kapljice u različite posude. Način primjene punjenja varira ovisno o različitim sustavima koji se koriste u FACS-u. Oprema koja se koristi u FACS-u poznata je kao razvrstavanje stanica koje aktivira fluorescenciju.

Kakva je sličnost protočne citometrije i FACS-a?


  • Protokna citometrija i FACS razvijeni su tako da diferenciraju stanice prema svojim optičkim svojstvima.

Koja je razlika između protočne citometrije i FACS-a?

Sažetak - protočna citometrija prema FACS

Stanica je osnovna strukturna i funkcionalna cjelina svih živih organizama. Sortiranje stanica je postupak kojim se stanice izoliraju i diferenciraju u različite kategorije na temelju njihovih unutarćelijskih i izvanstaničnih svojstava. Protokna citometrija i FACS dvije su važne metodologije za razvrstavanje stanica. Oba su procesa razvijena za razlikovanje stanica prema svojim optičkim svojstvima. Protok citometrija je metodologija koja se koristi tijekom analize heterogene populacije stanica prema različitim molekulama stanične površine, veličini i volumenu koja omogućava ispitivanje pojedinih stanica. FACS je postupak kojim se uzorak smjese stanica razvrstava prema njihovim karakteristikama raspršivanja svjetlosti i fluorescencije u dva ili više spremnika. To je razlika između protočne citometrije i FACS-a.

Preuzmite PDF verziju Flow Cytometry vs FACS

Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti je za izvanmrežne svrhe, prema napomeni. Ovdje preuzmite PDF verziju. Razlika između protočne citometrije i FACS-a

Referenca:

  1. Protočna citometrija (FCM) / FACS | Fluorescentno razvrstavanje stanica (FACS). Pristupljeno 22. rujna 2017. Dostupno ovdje Ibrahim, Sherrif F. i Ger van den Engh. "Protočna citometrija i razvrstavanje stanica." SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1. siječnja 1970.. Pristupljeno 22. rujna 2017. Dostupno ovdje

Ljubaznošću slike:


  1. 'Citometar' kod Kierana - vlastiti rad, (CC BY 3.0) putem Commons Wikimedia 'Fluorescentno sortiranje stanica (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Razvoj sustava in vitro modela za proučavanje interakcije Equus caballus IgE s visokim afinitetom FcεRI receptora (doktorski rad), Sveučilište u Sheffieldu, (CC BY-SA 3.0) putem Commons Wikimedia